更新時間：2023-12-21 
瀏覽次數：1863人胰島素原 (PI)ELISA使用說明書
胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 ， 它是由由胰島β細胞合成和分泌 ， 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ，只有極少量的胰島素原釋放入血 ，在病理情 況下 ，胰島β細胞釋放胰島素原增多 ，血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結構。 它是由芝加哥大學的Donald F. Steiner教授在1967年發(fā)現的。
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA） 。往預先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ，依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測 抗體 ，HRP 酶結合物 ， 中間經過溫育和洗滌 ，用底物TMB 顯色 ，TMB 在過 氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色 ，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定
吸光度（OD 值） ，計算樣品濃度。
靈敏度：4.79pg/mL
檢測范圍：12.5-800pg/mL
特異性：可檢測樣本中人的PI ，且與其類似物無明顯交叉反應。
濃度(pg/mL) | 800 | 400 | 200 | 100 | 50 | 25 | 12.5 | 0 |
OD 值 | 2.32 | 1.93 | 1.31 | 0.85 | 0.51 | 0.39 | 0.28 | 0.1 |
校正 OD 值 | 2.22 | 1.83 | 1.21 | 0.75 | 0.41 | 0.29 | 0.18 | - |
試劑盒性能：
1. 重復性 ：板內變異系數小于 10% ，板間變異系數小于 10%。
2. 回收率 ：在選取的健康人血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同
濃度水平的人PI ，計算回收率。
樣本類型 | 范圍（%） | 平均回收率（%） |
血清(n=8) | 84- 101 | 96 |
血漿(n=8) | 92- 105 | 102 |
細胞培養(yǎng)上清(n=8) | 96- 108 | 105 |
3. 線性稀釋：分別在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入
高濃度人PI ，在標準曲線動力學范圍內進行稀釋 ，評估線性。
稀釋比例 | 回收率（%） | 血清 | 血漿 | 細胞培養(yǎng)上清 |
1：2 | 范圍 |
84-95 |
88-97 |
90- 110 |
平均回收率 |
91 |
93 |
96 | |
1：4 | 范圍 | 89- 103 | 87- 108 | 105- 115 |
平均回收率 | 94 | 98 | 109 |
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